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LIMA™ 可調(diào)諧激光超高光譜顯微鏡

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品       牌

廠商性質(zhì)其他

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更新時間:2024-02-20 18:58:51瀏覽次數(shù):152次

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產(chǎn)品簡介

系統(tǒng)在可見光,近紅外,和短波紅外,都有很好的光譜分辨能力,使其能夠提供接近衍射極限的空間分辨率,無論暗場、激發(fā)光譜、標(biāo)準(zhǔn)明場反射或透射成像,該系統(tǒng)的全光譜響應(yīng)速度遠(yuǎn)超點(diǎn)掃描、線掃描的設(shè)備。

詳細(xì)介紹

LIMA™是一種基于寬帶可調(diào)諧激光光源的高光譜顯微鏡。它采用Photon etc.濾波技術(shù),配合連續(xù)可調(diào)的單色光、高功率密度激光進(jìn)行全視野照明。系統(tǒng)在可見光,近紅外,和短波紅外,都有很好的光譜分辨能力,使其能夠提供接近衍射極限的空間分辨率,無論暗場、激發(fā)光譜、標(biāo)準(zhǔn)明場反射或透射成像,該系統(tǒng)的全光譜響應(yīng)速度遠(yuǎn)超點(diǎn)掃描、線掃描的設(shè)備。

技術(shù)指標(biāo)

VIS

SWIR

eSWIR

VIS-SWIR

激發(fā)光譜范圍

400 – 1000nm

 

900 – 1620nm

1000 – 2500nm

400- 1620nm

激發(fā)光譜分辨率

FWHM

1.5 - 2.5nm

3.0 - 5.0nm

< 5.0 nm

1.5 - 5.0nm

激發(fā)波長

連續(xù)可協(xié)調(diào)激光器

連續(xù)可協(xié)調(diào)激光器

連續(xù)可協(xié)調(diào)激光器

連續(xù)可協(xié)調(diào)激光器

帶外抑制

< -60 db = ± 40 納米

< -60 db = ± 80 納米

< -60 db = ± 80 納米

< -60 dB = ± 40 納米 (VIS) 80 nm (SWIR)

可調(diào)諧激光光源輸出功率

2 – 4mW

3 – 9mW

0.5 - 8.0mW

2 – 9mW

照明

高效均勻照明;立體熒光或表面熒光,明場或暗場(油鏡、干鏡)

空間分辨率

亞微米 -(與顯微鏡目鏡數(shù)值孔徑相關(guān))

相機(jī)

sCMOS(可選CCD,EMCCD)

ZephIR™ 1.7 或者 Alizé™ 1.7 (InGaAs)

ZephIR™ 2.5 (HgCdTe)

sCMOS ZephIR™ 1.7 or Alizé™ 1.7

顯微鏡

直立或倒置科研級顯微鏡

白光照明

透鏡、反射、汞燈、鹵素?zé)?/span>

應(yīng)用案例

金納米粒子的高光譜暗場表征:識別和定位

 

暗場顯微鏡結(jié)合高光譜成像技術(shù),為研究組織、活細(xì)胞或溶液中的納米材料提供了一種行之有效的方法。來自等離子體或其他納米結(jié)構(gòu)的散射光,提供了關(guān)于其組成、大小和分布的相關(guān)信息。Photon提供了兩種不同的高光譜暗場成像平臺:一種基于可調(diào)諧激光光源(TLS),在激勵下進(jìn)行濾波和IMA圖像處理,一種提供了發(fā)射濾波的平臺。

可調(diào)諧激光光源系統(tǒng)(TLS)由兩個模塊組成,基于Photon etc.體布拉格光柵(VBG)技術(shù)的超連續(xù)光源(寬帶光源)和激光線可調(diào)諧濾波器(LLTF -帶通濾波器)。

IMA則由同樣基于體布拉格光柵(VBG)技術(shù)的高光譜成像濾波器、“超立方體(hypercube)”組成。當(dāng)與配備暗場電容器的科研級顯微鏡組合時,TLS和超立方體可以將該顯微鏡轉(zhuǎn)換為高光譜暗場設(shè)備,這些系統(tǒng)在可見光范圍 (400-1000 nm), 近紅外范圍 (900-1620) nm或可見-近紅外范圍(400-1620 nm)內(nèi)連續(xù)可調(diào)。該平臺可以無需特殊樣品制備的情況下,即可對納米材料進(jìn)行深入的表征。

 

TLS結(jié)果示例

在該研究中,Patskovsky等人利用高光譜暗場成像技術(shù)研究了靶向CD44+人乳腺癌細(xì)胞的金等離子體納米顆粒(AuNPs)。該方法已成功應(yīng)用于三維光譜定位和光譜分析。

“這種空間和光譜信息對于改進(jìn)基于納米等離子體的成像、復(fù)雜生物環(huán)境中的疾病檢測和治療至關(guān)重要。”

圖一,使用100X物鏡沿光學(xué)z軸在不同平面拍攝的暗場圖像。焦平面位于
a)玻璃基板表面(S點(diǎn))或b)人類乳腺癌細(xì)胞的上表面或細(xì)胞內(nèi)部(C點(diǎn))

 

Photon etc與華盛頓大學(xué)的David Ginger教授合作,利用Photon公司的高光譜暗場成像儀研究了100納米金納米顆粒。從432 nm到849 nm,以3 nm的步長采集散射數(shù)據(jù)。高光譜結(jié)果如圖2 a)和b)顯示,圖c)為從數(shù)據(jù)中提取的光譜圖,波長的變化可以幫助確定粒子的大小,而空間信息可以幫助評估它們的分布。

圖2 - a)從高光譜數(shù)據(jù)中提取的576 nm暗場圖像,b)區(qū)域放大圖,c)提取的散射光譜-顏色為對應(yīng)的采集點(diǎn)。

 

IMA結(jié)果示例

在École Polytechnique de Montréal的Michel Meunier教授的研究小組的這項(xiàng)工作中,IMA被用于表征用金納米顆粒(AuNPs)標(biāo)記的人類乳腺癌細(xì)胞。Photon公司的高通量高光譜濾光片可以快速獲取高分辨率光譜圖像。相機(jī)可以在視野中捕捉到整個圖像,因此可以實(shí)時收集信息,并跟蹤細(xì)胞和發(fā)光納米級組件的動態(tài)。 Photon 公司的PHySpec™軟件支持主成分分析功能(PCA),以識別并定位樣品中的納米顆粒。

圖3a)為60 nm AuNps標(biāo)記MDA-MB-23人乳腺癌細(xì)胞的暗場圖像。在60倍物鏡下,對150 × 112 μm2的視野區(qū)域從400 nm到650 nm成像,步長為2 nm,每個波長信號積累時間為2秒。細(xì)胞一般具有平坦的散射光譜,而金納米顆粒AuNPs在550 nm左右有一個尖峰。圖3b)為從乳腺癌的暗場高光譜數(shù)據(jù)中提取的550 nm圖像。在PCA 后,金納米顆粒用綠色標(biāo)記。 (圖3c)為乳腺癌細(xì)胞的放大圖, (圖3d)為含有AuNPs區(qū)域的光譜,證實(shí)了60 nm納米顆粒的存在。

圖3 - a) 60 nm大小的AuNps標(biāo)記的人乳腺癌細(xì)胞暗場圖像,b) 550 nm單色圖像,PCA后的AuNps用綠色標(biāo)記,c)癌細(xì)胞放大圖,d)不同區(qū)域AuNps的擴(kuò)散光譜(見對應(yīng)圖c)

 

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